Что такое незавершенный фагоцитоз
Фагоцитарная активность лейкоцитов
Выделяют следующие стадии:
— стадия хемотаксиса (приближение к объекту);
— стадия опсонизации (процесс взаимодействия иммуноглобулинов (IgG1, IgG3, IgM) и белков системы комплемента (C3b, C4, C5a) с инфекционной частицей);
— прикрепление опсонизированной частицы на поверхность фагоцита;
— стадия захвата; образование фагоцитосомы;
— стадия умерщвления и переваривания;
Вещества, участвующие во второй стадии, называют опсонинами. На фагоцитах есть рецепторы к Fc- фрагментам иммуноглобулинов и к белкам системы комплемента. Момент прикрепления опсонизированной частицы к макрофагу вызывает активацию последнего. Далее идет захват бактериальной клетки (антигена) и образование фагосомы. Лизосомы сливаются с фагосомами, при этом происходит резкое снижение рН и начинают действовать ферменты внутриклеточной бактерицидности (система миелопероксидаз). Образуются свободные радикалы, свободный кислород, которые быстро убивают бактерии. В зависимости от стадии исхода различают :
— полное разрушение фагоцитированного объекта;
— наблюдается персистенция микроорганизма;
— происходит размножение микроорганизма.
© 2009-2021 Здоровье 365
Уважаемые посетители! Данный сайт носит исключительно информационный характер: не следует использовать материалы, размещенные на сайте, в качестве медицинских рекомендаций. При наличии любых нежелательных симптомов, связанных с состоянием Вашего здоровья, обязательно проконсультируйтесь у врача-специалиста. Информация, размещенная на сайте, не является публичной офертой, определяемой положениями ч. 2 ст. 437 ГК РФ. Предоставление услуг осуществляется на основании договора об оказании медицинских услуг. Персональные, в том числе биометрические, данные сотрудников АО «Медицинские технологии», ООО «Медицинские технологии» размещены на официальном сайте (www.zdorovo365.ru) в целях исполнения п. 7 ч. 1 ст. 79 Федерального закона от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» с письменного согласия сотрудников. Перед получением услуги, пожалуйста, уточняйте информацию о ее стоимости и сроках оказания по телефону справочной службы +7 (343) 270-17-17 или в регистратурах клиник. Запрещается скачивать материалы сайта для любых целей за исключением личных, а также запрещается публикация, передача, воспроизведение и любое иное использование Произведений. Персональные, в том числе биометрические, данные сотрудников АО «Медицинские технологии», ООО «Медицинские технологии» размещены на официальном сайте (www.zdorovo365.ru) в целях исполнения п. 7 ч. 1 ст. 79 Федерального закона от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» с письменного согласия сотрудников.
Время приёма звонков
ПН–ПТ: С 7:30 до 21:00
Кликните по номеру для звонка
По вопросам рекламы,
поставок оборудования, сотрудничества:
Первичные иммунодефициты с дефектом системы фагоцитоза
Общая информация
Краткое описание
Первичные иммунодефицитные состояния (ИДС) – группа тяжелых генетически детерминированных заболеваний, вызванных нарушением одного или нескольких звеньев иммунных механизмов защиты, направленных на элиминацию чужеродных агентов из организма.
Соотношение кодов МКБ-10 и МКБ-9:
| МКБ-10 | МКБ-9 | ||
| Код | Название | Код | Название |
| D70 | Нейтропения врожденная | — | — |
| С91 | Лимфоидный лейкоз (лимфолейкоз) | — | — |
Дата разработки/пересмотра протокола: 2016 год.
Пользователи протокола: врачи общей практики, педиатры, детские онкологи/гематологи, иммунологи, хирурги детские.
Категории пациентов: дети.
Шкала уровня доказательности:
| A | Высококачественный мета-анализ, систематический обзор РКИ или крупное РКИ с очень низкой вероятностью (++) систематической ошибки результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию. |
| B | Высококачественный (++) систематический обзор когортных или исследований случай-контроль или Высококачественное (++) когортное или исследований случай-контроль с очень низким риском систематической ошибки или РКИ с невысоким (+) риском систематической ошибки, результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию. |
| C | Когортное или исследование случай-контроль или контролируемое исследование без рандомизации с невысоким риском систематической ошибки (+). Результаты которых могут быть распространены на соответствующую популяцию или РКИ с очень низким или невысоким риском систематической ошибки (++ или +), результаты которых не могут быть непосредственно распространены на соответствующую популяцию. |
| D | Описание серии случаев или неконтролируемое исследование или мнение экспертов. |
Автоматизация клиники: быстро и недорого!
— Подключено 300 клиник из 4 стран
Автоматизация клиники: быстро и недорого!
Мне интересно! Свяжитесь со мной
Классификация
Классификация
Дефекты функции нейтрофилов:
· Тяжелая врожденная нейтропения (дефицит ELANE);
· SCN2 a (дефицит GFI1);
· SCN3 (болезнь Костманна);
· SCN4 (дефицит G6PC3);
· SCN5;
· Болезнь накопления гликогена типа 1b;
· Циклическая нейтропения;
· Х-сцепленная нейтропения/миелодисплазия;
· Дефицит P14/LAMTOR2;
· Барс синдром;
· Коен синдром;
· Синдром Клерикузио – пойкилодерма с нейтропенией;
Дефекты подвижности:
· Дефект адгезии лейкоцитов тип 1 (LAD1);
· Дефицит адгезии лейкоцитов тип 2 (LAD2);
· Дефицит адгезии лейкоцитов тип 3 (LAD3);
· Дефицит Rac2;
· Дефицит b-актина. Локализованный ювенильный периодонтит;
· Папиллон-Лефевр синдром;
· Специфический дефицит гранул;
· Швахманна-Даймонда синдром.
Дефект респираторного взрыва:
· Х-сцепленная гранулематозная болезнь (ХГБ);
· Аутосомно-рецессивная ХГБ – дефицитphox p22;
· Аутосомно-рециссивная ХГБ – дефицит phox p47;
· Аутосомно-рециссивная ХГБ – дефицит phox p67;
· Аутосомно-рецессивная ХГБ – дефицит phox p40.
Болезнь одного гена (Менделианская болезнь):
· Дефицит β1 цепи к интерлейкину-12 и интерлейкину-23;
· Дефицит р40 к интерлейкину-12;
· Дефицит рецептора 1 g-интерферона;
· Дефицит рецептора 1 g-интерферона;
· Дефицит STAT 1 (аутосомно-доминантная форма);
· Дефицит макрофагов phox gp91;
· Дефицит интерферона-8 (аутосомно-доминантная форма);
· ISG15.
Другие дефекты IRF 8 (аутосомно-рецессивная форма):
· Дефицит GATA2 (Mono MAC синдром);
· Альвеолярно-легочный протеинозис.
Классификация врожденной нейтропении по степени выраженности:
· Легкая – абсолютное количество нейтрофилов (АКН) 1000-1500 в мкл;
· Средне-тяжелая – АКН 500-1000 в мкл;
· Тяжелая – число АКН менее 500 в мкл.
Диагностика (амбулатория)
ДИАГНОСТИКА НА АМБУЛАТОРНОМ УРОВНЕ
Диагностические критерии:
Жалобы: на гнойное отделяемое из наружного слухового прохода, появление налета на слизистой полости рта, появление гнойничковых высыпаний на кожных покровах, длительный кашель с гнойной мокротой, а частый жидкий стул, длительное повышение температуры, тупой болью в тазу и прямой кишке, усиливающиеся при дефекации.
Разнообразие жалоб продиктовано многообразием клинических проявлений осложнений ПИДа.
Физикальное обследование:
· оценка параметров физического развития: снижение веса, задержка роста, непропорциональный рост;
· кожа и подкожные ткани: обратить внимание на наличие кожных сыпей, фурункулов, кожных абсцессов, рубцовых изменений кожи после перенесенного фурункулеза;
· оценка состояния слизистой полости рта и зубов: стоматиты, гингивиты, расшатывание зубов, ранняя потеря зубов;
· пальпация периферических групп лимфоузлов: обратить внимание на размеры, консистенцию, болезненность лимфоузлов, отсутствие миндалин в зеве;
· аускультации (прослушивании) легких позволяет услышать различные хрипы; и ослабление дыхания в различных участках легких;
· пальпация печени и селезенки: позволяет выявить гепатоспленомегалию.
· Биохимический анализ крови:
− общий белок и белковые фракции – значительное снижение γ- фракции глобулинов на электрофореграмме общего белка, свидетельствует о нарушении синтеза иммуноглобулинов;
− определение белков воспалительных реакций: СРБ – характерен низкий уровень СРБ и других воспалительных параметров при инфекционном процессе при ПИДах;
− показатели активности, АЛТ, АСТ, общего билирубина, белково-осадочных проб (тимоловая проба) – позволяют оценить состояние биллиарной системы;
| Врожденная нейтропения | Гены ELANE, GFI1, HAX1, G6PC |
| Хроническая гранулематозная болезнь | Гены CYBA, NCF1, NCF2 |
| Дефицит адгезии лейкоцитов | Гены LAD1, LAD2, LAD3 |
− микробиологические исследования – посевы биоматериала (на флору и грибы) с определением антибиотикочувствительности со слизистых, из очагов инфекции (включая кровь, мочу, кал, бронхоальвеолярный лаваж, ликвор и биопсийный материал);
− гистологическое исследование лимфатических узлов – для выявления их дисплазии и герминантных центров (не развиты или отсутствуют), инфильтрацией аномальными клетками, схожими с клетками Лангерганса, Т-лимфоцитами и эритроцитами.
· Исследование на ВИЧ для исключения приобретенного иммунодефицита;
· Культуральные исследования различных локусов и различного биологического материала на выявление возбудителя и оценки его чувствительности к антибиотикам;
· Исследование биологического материала различных локусов на наличие патогенных инфекционных микроорганизмов методом полимеразной цепной реакции (ПЦР);
· Исследование гемокультуры при стойком, длительном повышении температуры тела.
· Исследование костного мозга на предмет блокировки производства нейтрофилов из клеток-предшественников (клеток, из которых в процессе их созревания образуются нейтрофилы).
Инструментальные исследования:
· УЗИ брюшной полости и забрюшинного пространства для оценки вовлеченности внутренних органов;
· УЗИ вилочковой железы;
· компьютерная томография грудной клетки с контрастированием сосудов даже при отсутствии указаний на подтвержденные пневмонии в анамнезе;
· рентгенография грудной клетки;
· рентгенография придаточных пазух носа в динамике.
Диагностический алгоритм
АЛГОРИТМ ДЕЙСТВИЙ ВРАЧА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ПЕРВИЧНЫХ ИММУНОДЕФИЦИТОВ С ДЕФЕКТОМ ФАГОЦИТОЗА
Шаг 1 – Сбор анамнеза с отражением рецидивирующих инфекций в нем. Семейный анамнез.
Шаг 2 – Осмотр (состояние лимфоидной ткани, размеры печени, селезенки).
Шаг 3 – Общий развернутый анализ крови:
Шаг 4 – проведение тестов 1-го уровня для оценки фагоцитоза относится определение:
· абсолютного числа нейтрофилов и моноцитов;
· интенсивности поглощения микробов нейтрофилами и моноцитами;
· способности фагоцитов убивать микробы.
При выявлении нейтропении и сниженных показателях фагоцитоза перейти к тестам 2 уровня, которые проводятся в условиях специализированных отделений.
К тестам 2-го уровня оценки фагоцитоза можно отнести определение:
· интенсивности хемотаксиса фагоцитов;
· экспрессии молекул адгезии (CD11a, CD11b, CD11c, CD18) на поверхностной мембране нейтрофилов.
Диагностика (стационар)
ДИАГНОСТИКА НА СТАЦИОНАРНОМ УРОВНЕ
Диагностические критерии: см. амбулаторный уровень.
Лабораторные исследования:
· общий анализ крови + лейкоформула ручным методом;
· биохимический анализ крови: ферритин сыворотки, железо сыворотки, трансферрин, АЛТ, АСТ, билирубин общий/фракции, щелочная фосфатаза, гамма‐глутамилтранспептидаза, общий белок, определение белковых фракций, креатинин, мочевина, электролиты;
· исследование крови на ВИЧ;
· определение основных клеточных субпопуляций лимфоцитов методом проточной цитофлуориметрии, (СД3, СД4, СД8, СД16, СД20, СД3+HLADR, CD3-HLADR), для выявления абсолютного и относительного дефицита Т и В- лимфоцитов;
· определение дополнительных клеточных субпопуляций лимфоцитов методом проточной цитофлуориметрии;
· определение в сыворотке крови иммуноглобулинов классов A,M,G,E (Ig), отражающих гуморальное звено иммунитета, для выявления снижения (гипо- гаммаглобулинемия) или полного отсутствия (агаммаглобулинемия).
| Врожденная нейтропения | Гены ELANE, GFI1, HAX1, G6PC |
| Хроническая гранулематозная болезнь | Гены CYBA, NCF1, NCF2 |
| Дефицит адгезии лейкоцитов | Гены LAD1, LAD2, LAD3 |
· микробиологические исследования – посевы биоматериала (на флору и грибы) с определением антибиотикочувствительности со слизистых, из очагов инфекции (включая кровь, мочу, кал, бронхоальвеолярный лаваж, ликвор и биопсийный материал);
· при наличии вакцинации БЦЖ микроскопия материала на кислотоустойчивые бактерии, а также выявление M.bovii методом ПЦР;
· ИФА и ПЦР на цитомегаловирусную, Эпштейн-Барр вирусную, герпес-инфекцию, токсоплазмоз;
· морфологическое исследование пунктата костного мозга с целью выявления уровня блока созревания гранулоцитов
Инструментальные исследования:
· УЗИ брюшной полости и забрюшинного пространства для оценки вовлеченности внутренних органов;
· УЗИ вилочковой железы;
· компьютерная томография грудной клетки с контрастированием сосудов даже при отсутствии указаний на подтвержденные пневмонии в анамнезе;
· рентгенография грудной клетки;
· рентгенография придаточных пазух носа в динамике.
Диагностический алгоритм: (схема)
Инструментальные исследования:
· УЗИ брюшной полости и забрюшинного пространства для оценки вовлеченности внутренних органов;
· УЗИ вилочковой железы;
· компьютерная томография грудной клетки с контрастированием сосудов даже при отсутствии указаний на подтвержденные пневмонии в анамнезе;
· рентгенография грудной клетки;
· рентгенография придаточных пазух носа в динамике.
Мазок на флору
Мазок на флору (микроскопия или бактериоскопия) — быстрая и информативная диагностическая процедура или обновить на актуальную) которая позволяет оценить состояние половых путей, состав микробиома влагалища, выявить признаки воспаления. Метод используют в рамках первичной диагностики гинекологических патологий. Врачи рекомендуют проходить исследование ежегодно, так как с его помощью можно выявить скрытые заболевания женского урогенитального тракта.
Сдать мазок на флору быстро и получить точные результаты можно в медицинском центре «Марта». Забор биоматериала проводит врач-гинеколог в процессе осмотра. Забо материала займет около 2 минут. Анализ выполняется 1-2 дня.
В каких случаях требуется проходить процедуру?
Мазок на флору применяется в гинекологии в качестве скринингового исследования нарушений микрофлоры влагалища. Анализ необходимо сдавать даже при отсутствии патологической симптоматики. С помощью теста можно выявить начальные отклонения в составе микробиоты влагалища и вовремя принять меры для профилактики развития изменений, например, бактериального вагиноза.
Женщине стоит в кратчайшие сроки записаться к гинекологу и сдать мазок на флору при наличии следующих жалоб:
Анализ позволяет исключить инфекционные причины отклонений и наличие активного воспалительного процесса во влагалище. При диагностике отдельных венерических инфекций назначают мазок на флору и чувствительность к антибиотикам (он же бактериальный посев, например, на гонорею).
Контроль микробиологического профиля слизистых половых органов актуален в следующих ситуациях:
В перечисленных ситуациях мазок на флору позволяет проверить состояние женской репродуктивной системы, предотвратить осложнения вмешательств, вовремя устранить дисбиоз влагалища.
Как проходит процедура?
Мазок на флору берут в процессе гинекологического осмотра. Для этого врач использует стерильные гинекологические зеркала, щетку для забора материала и предметные стекла. От того, как берется мазок на микрофлору, зависит информативность исследования. Анализ подразумевает изучение под микроскопом окрашенных мазков, взятых у наружного отверстия мочеиспускательного канала, стенок влагалища в области заднего свода и цервикального канала. Забор биоматериала проходит без каких-либо неприятных ощущений. Процедура занимает 1-2 минуты.
Где сдать мазок на флору в Минске?
Пройти гинекологический осмотр и сдать мазок на чистоту влагалища можно в медицинском центре «Марта». В клинике ведут прием опытные врачи-гинекологи, которые следуют принципам доказательной медицины. Лабораторные исследования выполняются в условиях современной лаборатории, что позволяет получать точные результаты в кратчайшие сроки.
Что часто выявляют в мазке?
Анализ мазков подразумевает их окрашивание по Граму для последующего изучения под микроскопом. В процессе визуального исследования определяют:
По результатам исследования определяют степень чистоты влагалища:
В зависимости от картины микроскопии мазков, врач-гинеколог может определить характер патологического процесса.
Фагоцитоз в результатах исследования
Явление фагоцитоза подразумевает захват и уничтожение чужеродных клеток защитными клетками организма. Незавершенный фагоцитоз в поле зрения микроскопа при анализе мазка означает, что были выявлены иммунные тельца с бактериями внутри. Это вариант нормы для здоровой женщины.
Кокковая флора
В норме на слизистых половых путей преобладает грамположительная палочковая флора. Преобладание микроорганизмов кокковой группы означает снижение местного иммунитета и появление благоприятных условий для развития воспалительных процессов. Фактически, это дисбиоз (нарушение состава микрофлоры), который можно расценить как промежуточное состояние между здоровьем и патологией, но для подтверждения диагноза необходимо уточнение жалоб и оценка состояния слизистых половых путей при осмотре у гинеколога.
Флора палочковая в мазке у женщин
В здоровой микрофлоре влагалища преобладают палочковые микроорганизмы (около 90%), они лактобациллы или палочки Дедерлейна. Продукты их жизнедеятельности обеспечивают стабильно-кислое pH среды. За счет этого сдерживается рост условно-патогенных микроорганизмов. Палочковая флора играет важнейшую роль в формировании местного иммунитета влагалища.
Частые вопросы об услуге
Как подготовиться к мазку на флору?
Чтобы результаты исследования мазков были точными, необходима специальная подготовка. За 2 дня до исследования нужно исключить:
В день посещения врача показано гигиеническое подмывание без моющих средств. За 2-3 часа до забора биоматериала нельзя мочиться.
Как долго делается мазок на флору?
Исследование выполняется 1-2 дня, что зависит от особенностей работы лаборатории.
Когда лучше сдавать анализ?
Исследование лучше делать через 2-3 дня после окончания менструации или в середине цикла. Результаты мазков на флору, выполненных перед месячными или сразу после них, могут быть некорректными.
Что показывает мазок на флору?
Исследование отражает состав влагалищной микрофлоры, инфекционные и воспалительные процессы.
Как берут мазок на флору?
Материал берут из половых путей в гинекологическом кресле. Процедура безболезненная и легко переносится женщинами.
Фагоцитарная активность лейкоцитов (венозная кровь) в Москве
Определение фагоцитарной активности лейкоцитов для оценки эффективности иммунного ответа на бактериальные инфекции.
Приём и исследование биоматериала
Когда нужно сдавать анализ Фагоцитарная активность лейкоцитов?
Подробное описание исследования
Иммунная система имеет много механизмов защиты от патогенных микробов. При попадании чужеродных частиц в организм выделяются вещества, которые оповещают об этом иммунные клетки — лейкоциты. Поступление их в очаг инфекции позволяет ограничить воспаление и не допустить распространение бактерий в организме.
В очаге инфекции лейкоциты поглощают и переваривают патогенные микроорганизмы, что в норме приводит к гибели как бактерий, так и клеток. Данный процесс называется фагоцитозом.
Выделяют два вида лейкоцитов, которые осуществляют фагоцитоз — нейтрофилы и моноциты. Нейтрофилы составляют большинство среди представителей лейкоцитов (до 70%), они содержат гранулы, которые позволяют успешно переваривать чужеродные частицы. Данные клетки образуются в костном мозге и циркулируют в крови, поступая в очаг инфекционного воспаления для осуществления фагоцитоза. Число нейтрофилов при бактериальных инфекциях значительно увеличивается.
Моноциты также образуются в костном мозге и поступают в кровь, через несколько дней перемещаясь в органы, где они превращаются в тканевую форму — макрофаги. В отличие от нейтрофилов, в крови содержится немного моноцитов, около 5-10% от всех лейкоцитов. Однако они играют важную роль в поддержании иммунитета. Функция моноцитов, или макрофагов, также заключается в поглощении патогенных микробов.
Фагоцитарная активность лейкоцитов отражает способность организма эффективно бороться с бактериальной инфекцией. Данный показатель ожидаемо повышается на фоне острых инфекционных заболеваний. При снижении иммунитета из-за хронических заболеваний, ВИЧ-инфекции и других патологических состояний фагоцитарная активность лейкоцитов уменьшается.
«Мазок на флору»: о чём расскажет анализ?
Исследование «Мазок на флору» относится к микроскопическому виду анализа. Тест назначают при подозрении на инфекционный процесс репродуктивных органов.
Для проведения анализа необходимо получить мазок. У мужчин биотопом является уретра, у женщин — цервикальный канал, влагалище, уретра. Исходя из места локализации патологического процесса, врач может направить женщину сдать мазок только из влагалища или цервикального канала. Однако чаще требуются все три локуса сразу.
| Взятие мазка — процедура безболезненная и безопасная. Все беременные женщины также сдают мазок минимум три раза: первый визит, 30 и 36 неделя, при условии нормально протекающей беременности. Полученный мазок переносится на стекло, высушивается и окрашивается, после чего врач-лаборант исследует препарат под микроскопом и описывает его. Бланк результата содержит информацию о микрофлоре, лейкоцитах, эпителиальных клетках и патологических агентах. | ![]() |
Микрофлора
В процессе анализа врач описывает её тип, обильность. В норме должна преобладать палочковая флора. Палочки являются представителями лактобактерий, поддерживают определенный уровень pH. Основная роль палочек — защита влагалища от болезнетворных микроорганизмов и стимулирование местных реакций иммунитета. Когда в мазке присутствует иные бактерии, например, кокковые, число палочек снижается. Такое состояние указывает на дисбиоз и требует обязательной коррекции.
Лейкоциты
Лейкоциты в мазке позволяют судить о наличии воспалительной реакции. Число лейкоцитов в графе «результаты» указывается через дефис. Первая и вторая цифры соответствуют минимальному и максимальному числу, обнаруженному в полях зрения микроскопа. Для каждого локуса есть свои референтные показатели. В цервикальном канале допустимо не больше 25 клеток в поле зрения, в уретре — не более 5, во влагалище — не более 10.
Увеличение абсолютного число лейкоцитов говорит о воспалении, поэтому необходимо получить консультацию гинеколога или уролога.
Эпителий
Эпителиальные клетки в препарате располагаются пластами или разрозненно в виде отдельных клеток. В мазке их число должно быть единичным. В случае увеличения количества клеток эпителия, врач указывает: умеренно — означает, что в одном поле зрения находятся до 10 эпителиальных клеток, много — до 20, обильно — свыше 25.
Изменение размера и морфологии клеток эпителия, могут косвенно говорить о воспалительной реакции или о проблемах гормонального характера. Клетки эпителия, покрытые по всей поверхности кокками, носят название «ключевых клеток». Обнаружение их в мазке является морфологическим критерием бактериального вагиноза.
Слизь
Значения «мало», «умеренно», «отсутствует» являются вариантом нормы. Если слизь присутствует в большем количестве, то это признак дисбиотических нарушений во влагалище.
Патологические элементы
В мазке врач может идентифицировать мицелий и споры дрожжеподобных грибков, трихомонады, актиномицетов, сперматозоиды и др. Но определить точную видовую принадлежность возбудителя не сможет из-за ограничений метода. Например, в урогенитальном тракте человека обитают несколько представителей рода Neisseriaceae, которые похожи между собой, поэтому отличить в стандартном микроскопе не представляется возможным.
Диагностическая чувствительность микроскопии при диагностике гонококковой инфекции в России составляет 30%, а трихомонадной инфекции — 44–68%. Микроскопия носит описательный характер, для точного определения вида возбудителя необходимо использовать молекулярно-биологические методы (ПЦР, NASBA) и культуральный метод.




