Что такое реакция кумбса

Антиглобулиновый тест. Прямая и непрямая реакция Кумбса.

1. Что такое антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса?

Антиглобулиновый тест, или реакция Кумбса проводится для того, чтобы выявить определенные антитела, которые атакуют красные кровяные клетки (эритроциты).

Антитела это белки, производимые иммунной системой. Как правило, антитела связываются с посторонними веществами, такими как бактерии и вирусы, и уничтожают их.

2. Зачем нужен тест на антитела?

Тест на антитела может проводиться в следующих случаях:

Перед переливанием крови

Вы наверняка знаете, что у человека может быть одна из четырех групп крови. И антиглобулиновый тест можно проводить для определения возможности переливания крови. Если вам делают переливание, кровь донора должна соответствовать вашему типу (иметь одинаковые антигены). Если при переливании антигены отличаются, иммунная система разрушит перелитые клетки. Это может привести к серьезным заболеваниям и даже смерти. Именно поэтому поиск нужного типа крови является столь важным фактором.

Для выявления риска резус-сенсибилизации

Женщине с отрицательным резус-фактором крови могут провести инъекцию анти-Rh- гаммаглобулина (например, RhoGAM), используемого для предотвращения развития Rh- гемолитической болезни.

Для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии

Аутоиммунная гемолитическая анемия является редким заболеванием, связанным с образованием антител к собственным антигенам эритроцитов.

3. Типы антиглобулиновой пробы

Существуют два типа антиглобулиновой пробы, или реакции Кумбса: прямой и непрямой.

Прямая реакция Кумбса, или прямой антиглобулиновый тест обнаруживает антитела, связанные с эритроцитами. Он используется для определения анемии. При этой болезни эритроциты разрушаются быстрее, чем производятся.

Непрямая реакция Кумбса, или непрямой антиглобулиновый тест проводится для поиска антител, не связанных с эритроцитами. Для пробы используется сыворотка крови, в которой и находятся антитела. Эта процедура достаточно редкая: в основном ее проводят для определения возможности переливания крови или как этап обследования беременных женщин.

4. Результаты реакции Кумбса

Отклонение от нормы:

Источник

Проба Кумбса непрямая

Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела

Синонимы русские

Аллоиммунные антиэритроцитарные антитела, Непрямая реакция Кумбса, Проба Кумбса косвенная, Непрямой антиглобулиновый тест, НАТ, Титр антирезусных антител, Реакция агглютинации для определения титра антирезусных антител

Синонимы английские

RBC Antibody Screen, Indirect Antiglobulin Test, IAT, Indirect Coombs Test, Indirect Anti-human Globulin Test, Antibody Screen, Anti Rh, Rh Typing.

Зачем нужно исследование?

Для выявления антител, направленных против антигенов эритроцитов

В каких случаях назначается?

Какой биоматериал используется для исследования?

Как подготовиться к исследованию?

Особой подготовки не требуется.

Что исследуется?

Титр антирезусных антител ищет циркулирующие антитела в крови, направленные против эритроцитов. Основная причина, по которой у человека могут циркулировать антитела к эритроцитам в крови, заключается в том, что он получил при переливании крови или во время беременности другие эритроциты, отличные от его (чужеродные эритроциты). Эти антитела могут нанести вред, если человеку попадут эритроциты, на которые могут нацеливаться антитела, или если у беременной женщины есть антитела, нацеленные на эритроциты ее развивающегося плода.

Эритроциты обычно имеют структуры на поверхности, называемые антигенами. У людей есть свой индивидуальный набор антигенов на их эритроцитах, определяемый наследованием от их родителей. Основными антигенами или поверхностными идентификаторами на эритроцитах человека являются антигены O, A и B, а кровь человека группируется в группу крови A, B, AB или O в зависимости от наличия или отсутствия этих антигенов.

Другим важным поверхностным антигеном является резус-фактор, также называемый D-антигеном. Если он присутствует в эритроцитах человека, его группа крови Rh + (положительная); если оно отсутствует, кровь имеет тип Rh- (отрицательный). Кроме того, существует много других типов антигенов эритроцитов, которые составляют менее известные группы крови, такие как Kell, Lewis, and Kidd группы крови.

Есть несколько причин, почему кто-то может производить антитела против антигенов эритроцитов:

После переливания крови: мы производим антитела, направленные против антигенов эритроцитов A и B, не подвергаясь воздействию антигенов. Перед переливанием крови группу АВО и резус-фактор человека сравнивают с донорской кровью, чтобы предотвратить возникновение серьезной реакции при переливания крови. То есть кровь донора должна быть совместима с кровью реципиента, чтобы антитела не реагировали и не разрушали клетки донорской крови.

Если кому-то переливают кровь, его организм может распознать другие антигены эритроцитов из других групп крови (например, Kell или Kidd), которые для донора не являются чужеродными. Реципиент (получатель) может производить антитела для атаки эти чужеродные антигены. Люди, у которых было несколько переливаний, вырабатывают антитела к эритроцитам, потому что они подвергаются воздействию чужеродных антигенов эритроцитов при каждом переливании.

В первый раз, когда человек подвергается воздействию чужеродного антигена антирезусных антител при переливании крови или беременности, он может начать вырабатывать антитела, но его клетки обычно не имеют времени во время первого воздействия, чтобы произвести достаточное количество антител для фактического уничтожения чужеродных эритроцитов. Когда происходит следующее переливание или беременность, иммунный ответ может быть достаточно сильным для того, чтобы достаточное количество антител было выработано, прикреплено и разделено (гемолизировано) на перелитые эритроциты или эритроциты ребенка. Антитела к антигенам АВО встречаются в природе, поэтому не требуют воздействия чужеродных эритроцитов.

Антитела к эритроциту, которые обнаруживаются с помощью скрининга, могут быть идентифицированы с помощью теста идентификации антител (Alloantibody Identification, Antibody ID, RBC, RBC Ab ID).

Кто назначает исследование?

Гематолог, трансфузиолог, терапевт, врач общей практики, ревматолог, педиатр.

Общие вопросы

Для чего используется исследование?

Скрининг антител к эритроцитам используется для скрининга крови человека на наличие антител, направленных против антигенов эритроцитов антирезусных антител, отличных от антигенов A и B. Это выполняется всякий раз, когда ожидается переливание крови, или при пренатальном тестировании беременных женщин.

Основная причина, по которой у человека могут циркулировать антитела к эритроцитам в крови, заключается в том, что он получил при переливании крови или во время беременности другие эритроциты, отличные от его (чужеродные эритроциты). Эти антитела могут нанести вред, если человеку попадут эритроциты, на которые могут нацеливаться антитела, или если у беременной женщины есть антитела, нацеленные на эритроциты ее развивающегося плода.

Если антитела обнаружены, то проводится идентификация антител, чтобы определить, какие антитела присутствуют. Выполняется скрининг антител к эритроцитам, если присутствуют клинически значимые антитела. В случае переливания крови необходимо принимать во внимание антитела к эритроцитам и подбирать донорскую кровь, которая не содержит антиген(ы), к которому человек выработал антитела.

Если у кого-то возникает реакция (немедленная или отсроченная) на переливание крови, врач назначит прямой антиглобулиновый тест (прямую пробу Кумбса), чтобы помочь выяснить причину реакции. (ПАГТ обнаруживает антитела, прикрепленные к эритроцитам). Если ПАГТ положительный будет проведено исследование антител к эритроцитам, чтобы определить, выработал ли пациент новые антитела.

Во время беременности непрямой антиглобулиновый тест используется для выявления антител в крови матери, которые могут проникать через плаценту и атаковать эритроциты ребенка, вызывая гемолитическую болезнь новорожденного. Наиболее серьезной причиной является антитела, вырабатываемые в ответ на антиген эритроцитов, называемый «антиген D» в системе группы крови резус (резус-фактор).

Человек считается резус-положительным, если D-антиген присутствует в эритроцитах, и резус-отрицательным, если отсутствует. Резус-отрицательная мать может выработать антитела, когда она подвергается воздействию клеток крови резус-положительного плода. Чтобы предотвратить это, у резус-отрицательной матери должен быть проведен непрямой антиглобулиновый тест в начале беременности, через 28 недель и перед родами. Если в течение 28 недель отсутствуют резус-антитела, женщине делают инъекцию резус-иммуноглобулина (RhIg), чтобы удалить резус-позитивные эритроциты плода, которые могут присутствовать в ее кровотоке, чтобы предотвратить выработку резус-антител матерью.

При рождении определяется резус-фактор ребенка. Если у ребенка резус-отрицательный результат, то матери не требуется повторная инъекция. Если у ребенка резус-положительный результат, а у матери отрицательный статус на антиген D, матери назначается дополнительный RhIG.

Этот тест также может быть использован для диагностики аутоиммунной гемолитической анемии в сочетании с прямым антиглобулиновым тестом. Это состояние может быть вызвано тем, что человек производит антитела против своих собственных антигенов эритроцитов. Это может происходить при некоторых аутоиммунных заболеваниях (например волчанка); при таких заболеваниях, как лимфома или хронический лимфолейкоз; при таких инфекциях, как микоплазменная пневмония и мононуклеоз. Это может также произойти с некоторыми людьми при использовании определенных лекарств (например пенициллин).

Когда назначается исследование?

Непрямой антиглобулиновый тест проводят перед любым предполагаемым переливанием крови.

Непрямой антиглобулиновый тест назначают на ранних сроках беременности как часть обследования каждой женщины при беременности. У резус-отрицательных женщин это также делается через 28 недель и после родов, если у ребенка определен резус-положительный результат. У отрицательных беременных женщин с известными антителами исследование иногда назначается в качестве инструмента мониторинга, чтобы приблизительно отслеживать количество присутствующих антител.

Что означают результаты?

Дополнительная информация.

Циркулирующее антитело к эритроциту, когда оно присутствует, никогда не исчезнет, ​​но может упасть до неопределяемого уровня. Если человек снова подвергается воздействию антигена, произойдет быстрая выработка и атака эритроцитов, поэтому антитело будет воспринято (обработано, как если бы оно присутствовало), даже если оно не обнаружено.

Каждое переливание крови подвергает человека комбинации антигенов на эритроцитах донора. Всякий раз, когда перелитые эритроциты содержат антигены, чужеродные эритроцитарному количеству реципиента (получателя), существует возможность для образования антител. Если у кого-то происходит много переливаний крови в течение определенного периода времени, он может производить антитела против многих различных антигенов. Это может затруднить поиск совместимой крови.

Что было до разработки RhIg (резус-иммуноглобулина)?

До разработки инъекции резус-отрицательные матери часто становились сенсибилизированными (повышение чувствительности организма) из-за крови своего первого резус-положительного ребенка и начинали вырабатывать анти-резус-антитела. Любые последующие резус-позитивные дети будут иметь некоторую степень резус-заболевания из-за того, что анти-резус-антитела матери атакуют эритроциты ребенка. Выкидыш и мертворожденные дети были распространены, и те дети, которые родились, часто нуждались в немедленном переливании крови, чтобы выжить. Иммуноглобулин инъекция в значительной степени предотвращает эти осложнения, хотя у небольшой количества женщин все еще развивается резус-антитела.

Источник

Что такое реакция кумбса

Принцип антиглобулинового теста Кумбса. Антиэритроцитные антитела неполного типа и молекулы комплемента (С), находящиеся на поверхности эритроцитов выявимы — прямой тест — их агглютинацией в контакте с животной сывороткой, содержащей антитела на человеческий антиглобулин (антиглобулиновая сыворотка). Свободные в сыворотке неполные антитела выявляются — косвенный тест — их закреплением на смеси нормальных эритроцитов группы 0, все антигены которых принадлежат известной резус-системе, далее агглютинируемые под воздействием антиглобулиновой сыворотки.

Материалы, реагенты антиглобулинового теста Кумбса: пробирки на 10/100 мл; градуированные пипетки на 1, 2 мл; пастеровские пипетки; штативы; предметные нешлифованные стекла; 8,5‰ раствор NaCl; эритроциты. Эритроциты больного, равно как и принадлежащие к группе 0 получим из свежеотобранной крови на противосвертывающем веществе (раствор ЭДТА).

Эритроциты группы 0 отобрать с таким расчетом, чтобы они исходили от лиц в норме и содержали все антигены резус-системы. Их можно сохранять до 7 дней в аутологической плазме, при температуре + 4°С. В случае отсутствия эритроцитов группы 0, известной антигенной мозаики, можно использовать смесь эритроцитов группы 0, резус-положительных и резус-отрицательных эритроцитов.

Сыворотка больного должна быть свежеотобранной.

Техника антиглобулинового теста Кумбса:
а) Прямой тест Кумбса: эритроциты больного промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl.
На несколько предметных стекол нанести по крупной капле из разведений антиглобулиновой сыворотки, а рядом — по маленькой капле из осадка эритроцитов больного; перемешать капли углом стекла. Приготовленный материал оставить на столе 5 мин., затем исследовать на наличие агглютинатов. В случае положительного результата определить максимальный агглютинирующий титр.

б) Косвенный тест Кумбса: эритроциты группы 0, резусположительные и резус-отрицательные промыть 3 раза 8,5‰ раствором NaCl и подвергнуть воздействию сыворотки больного из расчета 2 капли эритроцитов на 8—10 капель сыворотки, затем, в течение 60 мин., провести инкубацию при температуре 37°С. После этого снова трижды промыть эритроциты и воздействовать на них антиглобулиновой сывороткой, по указаниям для прямого теста Кумбса.

Когда речь идет о холодовых активных антителах сенсибилизацию эритроцитов группы 0 провести 60 мин. при температуре + 4°С.

Примечание: 1) Не проводить прямой тест Кумбса на эритроцитах, сохраненных один или несколько дней при температуре + 4°С или комнатной температуре, поскольку результаты могут оказаться ложноположительными за счет фиксации имеющихся в нормальной сыворотке непол ных, активных на холоде антител. 2) В случаях выраженной гиперпротеинемии промывать эритроциты 4—5 раз и проверить отсутствие сывороточных белков в последней промывной жидкости, с помощью сулфосалициловой кислоты.

Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021

Источник

Что такое реакция кумбса

Реакция Кумбса. Метод выявляет неполные (одновалентные) AT, образующиеся при бруцеллёзе, резус-конфликте или системных коллагенозах. Реакция также известна как антигло-булиновый тест. Для постановки реакции необходима антиглобулиновая сыворотка, содержащая полные (как минимум двухвалентные) AT.

Неполные AT предварительно инкубируют с корпускулярным Аг и вносят антиглобулиновую сыворотку. Одна молекула полных AT взаимодействует с двумя молекулами неполных AT, связавших Аг, в результате происходит видимая агглютинация или гемагглютинация (рис. 10-15).

Рис. 10-15. Выявление неполных антител ( AT ) (проба Кумбса). Соединение неполных AT (А) с Аг (Б) не вызывает агглютинации (1). Добавление антиглобулиновой сыворотки (В) приводит к появлению видимой агглютинации (2).

Метод латекс-агглютинации. В последние годы ассортимент диагностикумов из убитых микробов дополнили так называемые суспензионные Аг и AT, сорбированные на различных инертных корпускулярных носителях. Среди них наибольшее распространение нашёл метод латекс-агглютинации, основанный на взаимодействии Аг (или AT) в образце с частицами латекса, нагруженными специфическими моноклональными AT (или Аг), что ведёт к быстрому образованию видимых агрегатов.

Учёт результатов проводят через 10-15 мин при косом освещении на тёмном фоне. Разработаны коммерческие диагностикумы для выявления Аг Streptococcus pneumoniae, стрептококков группы В, Haemophilus influenzae типа b и капсулированных штаммов менингококка в различных тканевых жидкостях (СМЖ, сыворотке крови, моче). Также имеются наборы для выявления Аг стрептококков группы А в мазках из зева; для первичной экспресс-идентификации колоний стрептококков групп А, В, С, F, энтерококков, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae типов a-f, золотистого стафилококка, Neisseria meningitidis и Neisseria gonorrhoeae.

— Вернуться в оглавление раздела «Микробиология.»

Источник

Непрямая реакция Кумбса

Опубликовано 30 июня 2018 пользователем Imarketer

Горизонтальные табы

Непрямая проба Кумбса или непрямой антиглобулиновый тест (НАТ) необходим для определения антител к эритроцитам, содержащимся в сыворотке крови.

До настоящего времени проба Кумбса широко применяется в лабораторной практике для диагностики иммунопатологических состояний, в частности при аутоиммунных гемолитических анемиях, характеризующихся деструкцией эритроцитов вследствие связывания клеточной мембраны с антителами и (или) компонентами системы комплемента. С его помощью выявляют присутствие на эритроцитарной мембране IgG (обычно IgG1 и IgG3), которые могут активировать комплемент, а иногда и комплемента (С3d). Однако в остром периоде заболевания в связи с разрушением эритроцитов, на которых фиксировалось большое количество антител, при гемолитическом кризе, а также при недостаточном количестве антител при хроническом течении болезни может отмечаться отрицательная прямая проба Кумбса.

Непрямая проба Кумбса остается наилучшим методом индивидуального подбора трансфузионных сред, так как позволяет наиболее точно установить индивидуальную совместимость донора и реципиента по эритроцитарным антигенам.

Дополнительное выполнение прямого антиглобулинового теста на наличие аутоантител рекомендуется при обследовании всех реципиентов органов и тканей в предтрансплантационном периоде и реципиентов гемопоэтических стволовых клеток также и после трансплантации. Кроме иммуногематологии и трансфузиологии антиглобулиновые пробы широко применяются при диагностике целого ряда патологических состояний: при гематологических заболеваниях, включая лимфопролиферативные, при системных заболеваниях соединительной ткани, болезни Шегрена, хроническом активном гепатите и др.

Активно используются пробы Кумбса в медицинской генетике и судебной медицине для определения поверхностных эритроцитарных антигенов.

– для более точного установления резус-принадлежности (антиген D) при нечетких результатах определения резус-фактора другими методами (полиглюкиновый, желатиновый и др.);
– для выявления слабых эритроцитарных антигенов (системы Келл, Даффи, Кидд, Льюис и др.) и антител к этим антигенам;
– для обнаружения и идентификации аллоиммунных антиэритроцитарных антител, включая антитела, вызывающие гемолитические посттрансфузионные реакции;
– для определения наличия иммунных антител системы АВ0 при трансфузионных гемолитических осложнениях;
– в качестве пробы на совместимость при индивидуальном подборе переливаемой крови и ее компонентов.

Интерпртация
В норме реакция Кумбса отрицательная.

Положительный непрямой антиглобулиновый тест при отрицательной прямой пробе обычно указывает на присутствие в исследуемой сыворотке аллоантител в свободном состоянии, связанное с предшествующими переливаниями крови или беременностями.
Проба Кумбса часто бывает положительной при обострении пароксизмальной ночной гемоглобинурии; позитивная проба Кумбса с анти-С3 и анти-С3dg является маркером холодовой агглютининовой болезни.

Положительные результаты прямого и непрямого антиглобулиновых тестов не являются абсолютным доказательством наличия антител, поскольку положительные реакции могут наблюдаться и при различных патологических состояниях, не связанных с изосенсибилизацией или аутосенсибилизацией организма.

Поэтому только сопоставление результатов нескольких иммуносерологических методов с клинической картиной заболевания позволяет в полной мере судить о развивающемся патологическом процессе.

Источник